É o principal andrógeno secretado pelos testículos. A mensuração da testosterona sérica está indicada na avaliação de animais criptoquirdícos ou intersexos e na identificação de certas causas de infertilidade. Sua produção é estimulada pelo LH hipofisário, que por sua vez, é estimulado pelo GnRH hipotalâmico.

A testosterona livre reflete melhor a clínica, não sofrendo alterações com mudanças dos níveis de SHBG. A dosagem de testosterona pode ser usada na investigação da síndrome do ovário policístico, do hirsutismo feminino, na insuficiência testicular, na síndrome do testículo feminizante e na investigação do uso de esteróides
anabolizantes, dentre outros.